不失敗，少浪費，更輕松
發布(bu)日期：2022-04-06 11:20
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生化測定是煩難的，只有同時具備（1）質可靠、數合理和量充足的生物樣本，（2）合理的測定指標，（3）適合的測定方法，（4）質量合格和種類齊全的測定用品，（5）規范和到位的測定操作，和（6）充足的測定時間，才能輕松、及時得到可靠、真實的測定結果，得出明確、可靠的研究結論，發表高水平的研究論文。
課題組進行生化測定的目的依次是（1）確認某種生物學現象產生的分子機制，（2）發表高水平研究論文，（3）優質結題，（4）成功申請到新課題。
因此，課題組生化測定工作應該依次追求（1）不失敗，（2）少浪費，（3）更輕松。
生化測定失敗包括（1）生化測定工作未順利完成，沒有得到生化測定結果，（2）生化測定結果不可靠、不真實，據此撰寫和發表的研究論文存在造假風險，（3）已有生化測定結果不能得出明確結論，不能撰寫研究論文。
生化測定失敗本身就是最大的浪費！此外，生化測定浪費還包括（1）多測了不相關指標，（2）多測了不必要的生物樣本。
除了不失敗和少浪費外，更輕松也應該是生化測定工作的追求。畢竟課題組自身的時間和精力都是有限的。如果課題組能夠從煩難的生化測定工作中徹底解脫出來，就有更多的時間和精力用于研究方案設計、生物樣本準備、數據分析和研究論文寫作，從而顯著提升研究效率，取得更多、更高水平的研究成果，在激烈的同行競爭中脫穎而出。
生化測定的傳統方式是課題組自己完成全部測定工作。生化測定外包方式是課題組把煩難的生化測定工作全部或者部分委托給專業公司完成的新型測定方式。相比傳統方式，課題組選擇外包方式，可以更輕松地完成煩難的生化測定工作。
附錄
一、不失敗
評價生化測定是否成功的標準是能否（1）得出明確、可靠的研究結論，（2）發表高水平的研究論文！
要想不失敗(bai)，課(ke)題組(zu)就(jiu)必須（1）準備(bei)量充足和質可靠的生物樣本，（2）做好預測定，（3）選擇合(he)理的測定指(zhi)標。
1. 生物樣本的量不充足
生物樣本的量是指某種處理的某個取樣時間所取的生物樣本的量，如組織樣本的重量，液體樣本的體積，細胞樣本的細胞數等。生物樣本的量取決于單次測定的需要量，測定重復次數，測定指標數等，還需要加上預測定、驗證和可能加測指標的量。
生物樣本的量不充足，就無法完成全部生化測定工作，造成測定失敗。
解決辦法：能取盡取，寧可備而不用，不可用而不備。通常至少應該是測定順利時需要量的1.5倍！
2. 生物樣本的質不可靠
生物樣本的質包括（1）遺傳背景是否清晰、準確，尤其是細胞系、轉基因和基因敲除等，（2）取樣是否具備典型性、代表性和重復性，（3）在保存、寄送和提取過程中生物樣本是否變質，尤其是酶活性和易氧化物質，如維生素C和E，輔酶一和二等。
生物樣本的質不可靠，生化測定結果就不可靠，即不能反映測定指標的變化與特定生物學現象之間的關系。
解決辦法：做好預實驗，觀察不同處理組合中預期特定生物學現象，判斷（1）遺傳背景是否明確無誤，（2）哪種處理組合能夠穩定出現特定生物學現象，從而為正式實驗設置處理組合提供依據，并保證取樣的典型性、代表性和重復性。此外，在保存時注意生物樣本的速凍、小包裝、擺放方式和超低溫冰箱的日常管理，在寄送時注意干冰用量充足和外包裝隔溫效果，在稱量、勻漿提取和離心分離時注意確保始終處于實際低溫中等。
3. 預測定未做好
如果說做好預實驗能夠保證生物樣本的質可靠，從而保證生化測定結果的可靠性，那么做好預測定就能夠保證正式測定順利進行和正式測定結果真實，即生化測定結果反映了所測定生物樣本的真實變化。
通過預測定，可以發現測定能否順利進行和測定結果是否正常。
預測定不能順利進行，或者預測定結果異常，其原因可能包括（1）測定用品，如儀器設備性能不正常，或者試劑和耗材質量存在問題，（2）測定操作不規范、不到位，如溫度控制、勻漿均勻程度和加樣順序等，（3）生物樣本問題，如變質，存在干擾物質，平行樣本重復性差，本身就不含有待測定物質或者酶活性非常低等。
解決辦法：只是實事求是地找出導致預測定不能順利進行和預測定結果異常的真正原因，才能做出相應調整，保證正式測定順利完成和正式測定結果真實。
4. 漏測了緊密相關的測定指標
只有測定了某個代謝的緊密相關指標，才能得出特定生物學現象是否確實與該代謝相關，從而得出明確的研究結論，并進一步撰寫和發表研究論文。
相反，如果漏測了一個或者幾個緊密相關的測定指標，那么就無法得出明確的研究結論，也就不能撰寫和發表研究論文。
此外，測定指標數偏少，內容就會顯得單薄，也就無法撐起一篇研究論文，更加不要說高水平的研究論文了。
解決辦法：盡可能測定已知的某個代謝的全部測定指標。
二、少浪費
即使測定成功，也要盡可能少浪費。花費同樣的時間、精力和經費，爭取取得更多的科研成果，發表更多科研論文，從而在激烈的同行競爭中脫穎而出。
測定成本取決于單次測定成本和測定次數。單次測定成本取決于測定方法本身，通常難以顯著降低。測定次數取決于測定指標數、測定樣本數和生物樣本的重復性。
想要少浪費(fei)，課(ke)題組就必(bi)須(xu)科學、合(he)理地減少（1）測定指標數，（2）生(sheng)物樣本數。
1. 少測不相關的測定指標
測定指標數越多，測定成本就越高。
合理的測定指標是指（1）選擇的測定指標緊密相關，其測定結果能夠相互驗證和相互配合，保證得出明確、可靠的研究結論，并且能夠撰寫和發表高水平的研究論文；（2）不選擇相關性弱的測定指標，或者生物樣本中不含有的測定指標，這些測定指標的測定結果在得出明確、可靠的研究結論，尤其是撰寫和發表高水平研究論文時用不上。
少測不相關的測定指標，就可以顯著降低測定成本，即少浪費。
解決辦法：（1）根據參考文獻，集中選擇某個代謝本身的相關測定指標，不選擇其它代謝的測定指標；（2）通過預測定，發現所測定生物樣本中不含有的測定指標，在正式測定時刪除該指標。
2. 合理減少生物樣本數
生物樣本數越多，測定成本就越高。
生物樣本數取決于處理組合數、取樣間隔和生物樣本重復性。處理組合數越多，取樣間隔越小，生物樣本重復性越差，則生物樣本數就越多。
處理組合數是指對照組和處理組的總數。取樣間隔決定了組內取樣次數。單細胞生物樣本重復性最好，每個組的每個取樣時期可以只取3個平行樣本，甚至1個平行樣本（統計學意義上的大樣本）；室內培養的環境條件控制嚴格，組織或者器官的樣本重復性較好，可以取3個平行樣本；大田或者野生的環境條件變化比較大，生物樣本重復性比較差，可以取5個，甚至更多平行樣本。平行樣本數越多，則測定結果的標準誤越小，5個平行樣本的自由度為4，3個平行樣本的自由度為2，則前者標準誤只有后者的1/2。
解決辦法：（1）通過預實驗，找出某種特定生物學現象的產生條件，即相比對照組能夠穩定產生預期的生物學現象的處理組，在正式實驗時只設置對照組和處理組各一，處理組合數為2，從而極顯著地減少生物樣本數；（2）通過預實驗，確定從處理開始到產生預期生物學現象的時間，在正式實驗時設置合理的取樣間隔，從反映代謝變化過程的角度考慮，一般設置5個取樣間隔，從而顯著減少生物樣本數；（3）根據生物樣本的重復性，確定合理的平行樣本數，從而減少生物樣本數。
三、更輕松
目前課題組完成煩難的生化測定有3種方式，（1）傳統方式，即課題組自己完成全部測定工作，（2）試劑盒方式，即課題組購買相應的生化測定試劑盒，在公司的技術支持下自己完成預測定和正式測定，屬于部分外包，（3）代測方式，即課題組購買代測服務，由公司完成預測定和正式測定，屬于全部外包。
與傳統方式相比，試劑盒方式和代測方式不僅測定結果的真實性和可靠性更有保障，而且省心、省力和省時，即更輕松。
改善型課題組是指本身具備測定條件和測定能力，只是不愿意在建立合適的測定方法和配制試劑上花費更多精力和時間，從而輕松提高測定效率的課題組。
剛需型課題組是指課題組自身因為（1）測定所需的儀器設備不齊全，或者（2）測定操作不夠規范和到位，或者（3）測定時間緊張等，而不能及時、順利地完成生化測定工作的課題組。
試劑盒方式仍然需要課題組自己完成預測定和正式測定，所以試劑盒方式只適用于改善型課題組。
代測方式只需要課題組認真、及時和全面地審核公司提供的免費預測定結果，不需要自己完成預測定和正式測定，所以代測方式適合于剛需型課題組。
雖然代測方式的費用顯著高于試劑盒方式，但是與試劑盒方式相比，代測方式更加省心、省力和省時，改善型課題組也可以選擇代測方式。
可見，剛需型課題組選擇代測方式，改善型課題組選擇試劑盒方式，才可以更輕松地完成煩難的生化測定。
必須指出的是(shi)，我司10年生化測定外包實踐表明：課題組必須做到（1）謹慎選擇一家靠譜的生化測定外包公司，（2）在準備生物樣本前就咨詢該公司，（3）與該公司相互配合，盡到各自的責任，才能保證生化測定工作不失敗、少浪費和更輕松[1~3]！
參考文獻
[1] 課題組防騙單指南
22506.cn/a/news/kemingguandian/2022/0311/2094.html
[2] 課題組咨詢清單
22506.cn/a/news/kemingguandian/2022/0321/2096.html
[3] 課題組生化測定外包省錢指南
22506.cn/a/news/kemingguandian/2022/0329/2097.html
