發(fa)布日期(qi):2024-03-21 11:07 瀏覽次(ci)數: 作者(zhe):admin
1 一個實例
曾經有個碩士研究生向我報告:蠶卵酶活性變化無規律。與其討論后,我未發現原因何在。無奈之下,我決定旁觀該生的測定全過程。發現:在勻漿后,該(gai)生只是用洗瓶簡單沖(chong)洗勻漿器的(de)刀頭,刀頭縫隙中仍然殘留了上一份樣本的碎片,污染了下一份樣本。在每次勻漿后都徹底清理刀頭后,蠶卵的酶活性變化就出現了規律。
測定操作規范是指按照實驗指導書或者說明書進行了操作。測定操作到位是指該步操作實現了目(mu)的。
在上述實例中,刀頭清洗不到位導致蠶卵酶活性變化無規律。該生測定操作規范,在勻漿后對刀頭進(jin)行了沖洗;但是該生測定操作不到位,簡單的沖洗并沒有實現徹底清除殘留物的目的。
2 測定操作不到位
生化測定操作依次為:(1)配制溶液,(2)測定取樣,(3)稱量樣本,(4)提取,(5)分離,(6)加液,(7)反應,(8)測量。
2.1 配制溶液不到位
(1)稱量不精確,(2)未按照順序逐個加入不同試劑并溶解后再加入下一種試劑,(3)交叉污染(ran),(4)臨用前配制的試劑配(pei)制過早或者未及時(shi)用完(wan)。
2.2 測定取樣不到位
所取部分不能代表(biao)該重復樣(yang)本(ben)的整體狀況。有些樣本存在空間異(yi)質性,導致測定指標的含量或者活性在樣本的不同(tong)部位(wei)存在差(cha)異。
2.3 樣本稱量不到位
(1)不(bu)精確,固態樣本的克數、液態樣本的毫升數或者單細胞樣本的百萬細胞數;(2)不迅速,凍樣升溫或者吸附水分,干樣返潮。
2.4 提取不到位
(1)不充分,細胞、組織或者器官未充分破碎;(2)不一致,不同樣本破碎程度不一致,尤其是手動勻漿時;(3)降解(jie)或者失活,尤其是升溫導致擬測定物質降解或者酶失活。
2.5 分離不到位
(1)不徹底(di),干擾物質殘留多;(2)降(jiang)解或者失(shi)活,升溫或者分離液導致擬測定物質降解或者酶失活。
2.6 加液不到位
(1)體積不(bu)精確,導致測定值重復性差;(2)順序錯亂,未嚴格按照實驗指導書或者說明書的順序依次加入各種溶液;(3)漏加(jia)液或者重(zhong)復加液,漏加液導致反應不能進行,重復加液導致測定值重復性差;(4)交叉污染,加不同溶液時未更換槍頭。
2.7 反應不到位
(1)未混勻,未震蕩混勻反應體系;(2)未嚴(yan)格控制反(fan)應條件,尤其是確保反應時實際溫度是指定的溫度。
2.8 測量不到位
(1)終止型反應未在顯色(se)復合物(wu)穩(wen)定期進行測量,(2)連續型反應未在(zai)線性期測量,(3)連續型反應未控制加完溶液到初始測量的時(shi)間盡可能一致,導致不同樣本測量初始值相差很大。
3 解決辦法
3.1 反復訓練,積累測定操作經驗
為了保證研究生測定操作到位,課題主持人花費大量的時間和經費,來反復訓練研究生,尤其是碩士研究生的測定操作。由于學制原因,具備豐富測定經驗的研究生按期畢業。課題主持人不得不從頭重新訓練新的研究生。
如此循環往復,課題組持續投入(ru)大量(liang)的時間(jian)和精力(li),來訓練研究生的測定操作,但是課題組的測定效率卻始(shi)終(zhong)低下,難以在同行競爭中脫穎而出,不斷申請到新課題,實現課題-論文的良性循環。
3.2 選擇代測服務,借助于專業公司的測定能力
代測服務:課題組購買專業公司的代測服務,公司負責預測定和正式測定,課題組(zu)只需(xu)準備合(he)格(ge)的樣本和審(shen)核測(ce)定數(shu)據。
我司為代測用戶提供:(1)咨(zi)詢,如何選擇合理的測定指標,如何準備合格的樣本,如何選擇合適的測定方法;(2)系(xi)列成(cheng)套高質量的代(dai)測服(fu)務,目前可測定968種生化指標;(3)免費預測定(ding),用戶對預測定結果滿意后再簽訂正式代測合同;(4)可疑(yi)測(ce)定(ding)結果的驗證(zheng)、原因查找(zhao)和針對性改進,保證生化測定數據可靠、真實和可用,從而發表SCI論文,防止發表后(hou)被迫撤(che)回。
選擇我司生化代(dai)測服務,可以全面排除生化測定風險,從而用戶能夠輕松、及時拿到可靠、真實和可用的生化測定數據,據此得出明確、可靠的研究結論,發表更多SCI論文,課題主持人得以優質結題,研究生得以順利畢業。
備注
生化測定的5類風險:(1)測定指標漏選(xuan)、少選或者分散;(2)樣本質不可靠、數不(bu)合理或者量不充足;(3)測定方法專一性弱、重復性差或者靈(ling)敏(min)度低;(4)測定用品儀器(qi)設備性能落后(hou)、試劑純度低(di)或者耗材質(zhi)量差;(5)測定操作不規(gui)范(fan)、不(bu)到位。其中,最常見的風險是測定操作不到位。
試劑盒方式不適合生化測定操作(zuo)不到位的用戶:(1)碩士研究生(sheng),(2)非生化、生理專業的博士研究生或者老師。僅僅做過生化課程實驗并不能保證生化測定操作到位。
如果您的生化測定操作不到位,那么請務必選擇我司生化代測服務,從而避免測定反復,甚至失敗,導致試劑、樣本和時間的浪費。