發布日期：2022-09-06 11:19 瀏覽次數： 作者：admin
乙酰乳酸合成酶概述
乙酰乳酸合成酶（acetolactate synthase，ALS）也稱為乙酰羥酸合成酶（acetohydroxyacid synthase，AHAS），是植物和微生物體內合成支鏈氨基酸亮氨酸、纈氨酸和異亮氨酸的關鍵酶。ALS催化一分子2-丁酮酸和一分子丙酮酸形成2-乙酰基-2-羥基丁酸或催化2分子丙酮酸形成2-乙酰乳酸，其中2-乙酰基-2-羥基丁酸是合成異亮氨酸的前體化合物，2-乙酰乳酸是合成纈氨酸和亮氨酸的前體化合物。
乙酰乳酸合成酶是磺酰脲類、咪唑啉酮類和三唑并嘧啶類等除草劑的靶標酶，ALS抑制劑類除草劑通過抑制植物體內ALS活性，導致支鏈氨基酸合成受阻，進而影響蛋白質合成，導致細胞無法完成分裂，停止生長，最終死亡。還有研究表明，ALS有作為除菌化合物作用位點的潛力。此外，ALS催化2分子丙酮酸生成的2-乙酰乳酸，經過非酶催化產生雙乙酰，相比傳統化學合成生成雙乙酰，更加安全環保。
乙酰乳酸合成酶測定，主要是依靠ALS催化丙酮酸產生乙酰乳酸，乙酰乳酸脫羧后產生乙偶姻，乙偶姻在堿性環境下與肌酸和α-萘酚反應產生紅色物質，在525nm處有吸光度，通過測定乙偶姻生成量來計算ALS活性。但是實際操作中，需要對酶蛋白進行繁瑣的純化，影響了測定的效率。
在此原理基礎上，科銘進行了一系列的優化，國內首次研發了商品試劑盒。在將干擾降至最低的前提下，簡化了蛋白純化的步驟，加快了測定速度，提高了通量，使實驗更加高效。
1. 節省測定時間，加快測定速度，通量大
科銘ALS活性試劑盒簡化了步驟，去除了繁瑣的洗脫透析等步驟，全程僅需90分鐘。微量法一次性可以測定48管樣品，通量大。
2. 測定準確，受干擾小
在盡量提高測定效率的同時，通過對實驗體系的優化，排除了體系內的干擾，確保了實驗的準確性。
3. 靈敏度高，線性范圍廣
