發布日期：2022-09-15 12:37 瀏覽次數： 作(zuo)者：admin
凡事預則立，不預則廢。例如，當你準備撰寫論文時，才發現測定數據不可靠、不真實或者不可用，那就非常被動了，只能重新準備樣本，再次進行測定，結題和畢業很可能都被迫延期。
如何“預”？
非常重要的就是，以終為始，厘清并控制測定及其外包的各種風險（始），才能“輕松、及時拿到可靠、真實和可用的測定數據”（終）。
以生化測定為例。可靠是指測定數據可靠地反映所研究生物學現象與某種代謝的關系，即該生物學現象產生的代謝機制。真實是指測定數據反映了所測定樣本中生化測定指標的真實狀況。可(ke)用是指根據測定數據能夠得出明確、可靠的研究結論，并發表高水平的研究論文，包括：（1）變異系數較小，（2）測定值未明顯偏離文獻報道，（3）處理組和對照組差異顯著，（4）呈現明顯的變化趨勢，（5）不同測定指標的變化趨勢能夠相互驗證和相互配合。及(ji)時是指按計劃完成全部測定工作，并且拿到可靠、真實和可用的測定數據，從而優質結題和順利畢業。輕(qing)松是指樣本準備和測定的綜合成本低，綜合成本包括：（1）費用，（2）時間，（3）精力，從而有足夠的時間和精力，用來閱讀文獻、設計研究方案和撰寫研究論文。
就生化測定而言，“預”就是厘清并控制好樣本準備和測定兩個階段不同風險點；就生化測定外包而言，“預”就是厘清測定方式和測定外包公司選擇，以及與測定外包公司交流的風險點！
值我司11周年慶之際，謹以此文奉獻給各課題組，祝大家優質結題和順利畢業！
1. 準備生物樣本階段的風險
質可靠、數合理和量充足的生(sheng)物樣本，是順利完成生化測定，并保證生化測定數據可靠、真實和可用的前提。
風險1：生物樣本的質不可靠
生物樣本的質包括：（1）遺傳背景是否清晰無誤，種、品種和細胞系（株）是否混淆，轉基因是否成功轉入和表達，基因敲除是否成功等；（2）對照組和處理組，尤其是對照組，不同個體的生長發育是否整齊；（3）與對照組相比，處理組是否出現預期的生物學現象；（4）取樣是否具備典型性、代表性和重復性；（5）在儲存和運輸過程中是否變質，尤其是擬測定指標（含量或者活性）是否發生顯著變化。
質可靠的生物樣本，才能保證生化測定數據可靠地反映了所研究的生物學現象是否與某種代謝相關，即生化測定數據的可靠性，從而避免因為質不可靠而不得不重新準備生物樣本，不能輕松、及時拿到生化測定數據。
取樣具備典型性，即處理組與對照組在所研究的生物學現象上存在顯著差異，生化測定數據才可能存在顯著差異。取樣具備代表性(xing)，即所取樣本能夠代表對照組和處理組各自的整體狀況，生化測定數據才能可靠地反映對照組和處理組在某種代謝上的差異。取樣具備重復性，即同一組內同一取樣時間點所取的重復樣本的差異小，才能有效降低生化測定數據的標準誤，從而縮小其變異系數，避免因為標準誤過大而在差異顯著性檢驗中得出差異不顯著的錯誤結論。
通過預實驗，可以保證生物樣本的質可靠：（1）觀察對照組的生長發育情況，（2）觀察各處理組的生長發育情況，尤其是所研究生物學現象的典型性、代表性和重復性，從而在正式實驗時保證取樣的典型性、代表性和重復性。
風險2：生物樣本的數不合理
生(sheng)物樣本的數(shu)是指生物樣本的種數，取決于處理組合數（含對照組）和取樣間隔。處理組合數越多，取樣間隔越短，生物樣本的數就越多。而生物樣本的數越多，準備生物樣本和生化測定的綜合成本（經費、時間和精力）就越高。
生物樣本的數合理是指：（1）能夠反映代謝的變化過程，包括不同測定指標變化的先后，同一測定指標變化的拐點，從而明確代謝變化的關鍵指標；（2）適當降低綜合成本，尤其是測定的綜合成本。
只有生物樣本的數合理，才能保證生化測定數據的可用性，并顯著降低綜合成本。
通過預(yu)實驗(yan)，可以：（1）觀察在不同處理中所研究的生物學現象出現情況，（2）找出最合適的處理，即典型性、代表性和重復性綜合表現最好的處理，（3）從處理開始到出現所研究的生物學現象所需要的時間，從而在正式實驗時：（1）只設置兩種處理組合（對照組和處理組各一種），顯著減少了處理組合數，例如與四種處理組合（對照組一種合處理組三種），生物樣本數下降一半；（2）設置合理的取樣間隔，例如把從處理開始到出現所研究生物學現象的所需時間五等分，既保證能夠反映代謝變化過程，又不至于生物樣本數過多。
風險3：生物樣本的量不足
生物(wu)樣本的量，是指對照組和處理組每個重復每次取樣的量，固體樣本的克數，液體生物樣本的毫升數，單細胞樣本的百萬數等。
生物樣本的量取決于測定總次數，即單次測定的需要量、測定重復次數和測定指標種數。
量充足的生物樣本，是順利完成生化測定的保證。原則是“能取盡取，寧可備而不用，不可用而不備”。實際上應該準備理論需要量的至少1.5倍。
在確定了測定指標種類和測定方法后，通過預(yu)實驗，可以觀察到對照組和處理組的生長發育情況，尤其是擬取樣的組織、器官和個體，或者單細胞生物的生長發育情況，從而為正式實驗時的培養規模提供參考，以確保在正式實驗中有足夠的樣本可取。
風險4：生物樣本保存和運輸過程中變質
在保存和運輸過程中，一旦生物樣本發生變質，尤其是擬測定指標發生顯著變化，那么生化測定數據就變得不可靠了。
生物樣本一般需要低溫保存和運輸，即通過低溫防止保存和運輸過程中生物樣本變質。因此，關(guan)鍵是控制好低溫：（1）取樣后就地液氮速凍，如果樣本體積比較大，應該先行切分到適當大小后再速凍；（2）放置到超低溫冰箱前分成小包裝，一來便于在冰箱中好放置并在樣本袋之間保持適當空隙，避免堆積堵塞通風，造成溫度不均勻，二來避免測定前稱量樣本時多次取出樣本而造成反復凍融，而引起樣本變質；（3）密切注意冰箱管理，尤其是防止未發現停電造成樣本融解后再凍結現象，以及其他人取出樣本時冰箱門長時間打開，甚至翻找樣本時把你的樣本取出長時間放在室溫下的情況；（4）運輸時一定要保證樣本始終處于低溫中，用保溫箱，并且在保溫箱中放入足夠的干冰或者冰袋。
此外，樣本標簽很重要，一旦標簽脫落或者模糊超過兩個樣本，則無法再核對，導致整批樣本作廢！建議：（1）雙標簽，即一個樣本用兩個樣本袋，內層樣本袋一個標簽，外層和內層樣本袋之間再放一個同樣的標簽，如果是樣本管，則樣本管上一個標簽，樣本管外再套一個樣本袋，樣本袋內放一個同樣的標簽；（2）雙取樣記錄，即紙質實驗記錄表一份取樣記錄，電腦一份取樣記錄；（3）選用優質計號筆（不易因為水汽或者有機溶劑而模糊），或者用鉛筆書寫標簽。
2. 生化測定階段的風險
生化測定的風險包括：（1）代謝類型沒選準，（2）測定指標種類不合理，（3）測定方法不合適，（4）測定用品質量和性能不合格，（5）測定操作不規范、不到位，（5）未做好預測定，等等。
2.1 代謝沒選準
生化測定的目的：明確所研究的生物學現象與某種代謝的關系。
如果沒有選準代謝類型，那么測定數據將表明該代謝與所研究的生物學現象無關，嚴重降低生化測定的意義和發表高水平的研究論文。
就已經獲批的課題而言，申請人結合已有研究基礎，經過精心推理，提出了研究假說，又經過專家兩輪以上的評審，一般不會選錯代謝類型，按計劃執行就OK啦。但是，并不能完全排除選錯代謝類型的可能，同時隨著新文獻和自己研究的進展，調整研究計劃，甚至改選其他代謝，也是又可能的。因此，在制定研究方案時，還是有必要再次認真評估一下所選代謝類型！
2.2 測定指標種類不合理
在選定代謝類型后，就需要選擇測定的指標種類。
合理的測(ce)定指標種(zhong)類應該：（1）根據測定數據，能夠得出明確、可靠的研究結論，即該代謝是否確實與所研究的生物學現象有關；（2）測定數據能夠支撐起至少一篇高水平研究論文。
因此，合理的測定指標種類應該集中選擇該代謝已知的全部可測定指標，并且至少三種以上，包括物質含量、催化合成該物質的酶活性和催化降解該物質的酶活性。
不合理的測定指標種類：（1）漏測了緊密相關的指標，導致無法得出明確、可靠的研究結論，也就不能發表高水平的研究論文；（3）測定指標種類過少，無法支撐起一篇高水平研究論文；（2）多測了無關指標，造成浪費，包括經費、時間和精力。
2.3 測定方法不合適
確定了測定指標種類后，就需要建立合適的測定方法。
只有合適的測定方法，才能保證測定順利進行和測定數據真實、可用。
合適(shi)的測定方法(fa)包括：（1）測定方法是否具備測定對象的專一性、測定數據的重復性和測定操作的簡便性，（2）測定方法是否適合所測定的生物樣本，（3）測定方法所需的測定用品，尤其是儀器設備，是否具備。
2.3.1 測定方法的專一性、重復性和簡便性
一種測定指標通常有多種測定方法。我們需要憑借豐富的測定經驗，依次認真比較不同測定方法的專一性、重復性和簡便性，從中選出2~3種測定方法。
測定方法的專一(yi)性是指測定對象的專一性。測定對象的專一性是第一位的。如果測定對象不專一，即擬測定物質A的含量，測定方法卻不能區分其類似物B或者衍生物C，把物質B或者物質C也當成物質A給測定了，這樣測定到的物質A的含量就包含了物質B或者物質C，那么這樣的測定數據是毫無意義的，并不能反映樣本中物質A的真實含量。測定對象的專一性取決于：（1）測定原理，（2）測定前處理（提取和分離）。
測定方法的重復性是指測定數據的重復性。測定數據的重復性是第二位的。如果測定數據重復性差，那么就會導致得出錯誤的差異顯著性檢驗結論。這樣的測定數據同樣是沒有意義的。測定數據的重復性包括樣本重復性和技術重復性。樣本重復性前面已經介紹了。技術重復性又包括：（1）測定方法的重復性，（2）測定用品的重復性，（3）測定操作的重復性。測定方法的重復性是反應體系的穩定性，尤其是pH和離子強度等。
測定方法的簡(jian)便性是指測定操作簡便。測定操作簡便性是第三位的。如果測定操作越煩，那么測定誤差就越大，而且測定成本，尤其是時間和精力，就越高。如果測定操作越難，那么測定失敗的可能性就越大，相應地對測定人員的要求也就越高。
2.3.2 測定方法是否適合所測定的樣本
生物樣本具備成分復雜、未知成分多和擬測定物質含量或者酶活性變化范圍大等特點。因此，在綜合比較不同測定方法的專一性、重復性和簡便性的基礎上，還必須考慮測定方法是否適合擬測定生物樣本！
選擇的測定方法是否(fou)適合擬測定的生物樣(yang)本，在參考文獻的基礎上，只有通過測定實際樣本，即預測定，才能最終確定該測定方法是否真正適合擬測定的生物樣本。必要時對測定方法進行優化，甚至更換測定方法。
只有適合擬測定生物樣本的測定方法，才能保證測定順利進行和測定數據可靠、真實和可用。
2.3.2 是否具備測定方法所需的測定用品
每種測定方法都有所需要的測定用品，包括：（1）儀器設備，（2）試劑，（3）耗材。
缺乏任何(he)一種測(ce)定(ding)用品，測(ce)定(ding)都無法順(shun)利(li)進行。測(ce)定(ding)用品的質(zhi)量和性(xing)能嚴重影(ying)響測(ce)定(ding)數據(ju)的真實性(xing)和可用性(xing)。
與分光光度計相比，酶標儀具備兩個優點：（1）測定數據重復性好，因為能夠自動混勻和嚴格控制反應溫度，（2）測定效率高，因為一次即可掃描整塊酶標板，拿到數十個，甚至數百個測定數據。與手動勻漿相比，自動勻漿機(ji)具備兩個優點：（1）勻漿效率高，因為一次能夠勻漿十個樣本以上；（2）勻漿程度一致，不像手動勻漿容易因為累或者認真程度變化，而造成不同樣本的勻漿程度不一致，甚至差異巨大到掩蓋不同樣本中擬測定指標本身的差異。與手動進樣相比，自(zi)動進樣器具備兩個優點：（1）解放了測定人員，不再需要測定人員守在液相色譜儀旁，（2）測定數據重復性好，顯著減少了測定人員操作帶來的誤差。
2.4 測定用品質量或者性能不合格
工欲善其事，必先利其器。測定用品質量或者性能不合格，也是導致測定不能順利進行，或者測定數據不真實、不可用的重要原因。
常見的包括：（1）儀器設備性能不穩定，（2）試劑純度不夠，（3）耗材質量差異大，或者被污染。
2.5 測定操作不規范或者不到位
測定操作包括：（1）取樣，（2）稱量，（3）提取，（4）分離，（5）反應，（6）測定。
規范是指嚴格按照說明書進行操作。到位是指操作確實實現了該操作的目的。測(ce)定(ding)操作(zuo)不規(gui)范或者不到位(wei)，是(shi)測(ce)定(ding)不能順利進行，或者測(ce)定(ding)數據(ju)不真實、不可(ke)用的最(zui)常見原因(yin)。
例如，反應溫度的控制。除了哺乳動物外，一般生物樣本的酶活性測定要求在25oC中進行反應。操(cao)作規(gui)范：打開酶標儀，并設定溫度在25oC。操作到位(wei)：由于目前酶標儀只具備加熱功能，不具備制冷功能，如果實驗室氣溫超過25oC，就必須打開空調，先把實驗室氣溫降低到20oC左右；測定前提前打開酶標儀，設定溫度在25oC，預熱至少0.5小時；測定前從冰箱中取出各種試劑，打開水浴鍋，并設定溫度在25oC，立即把試劑瓶安全地放置到水浴鍋中，待水浴鍋顯示溫度穩定在25oC后，就可以吸取各種試劑，加入酶標板各孔中。與操作規范相比，操作到位是要確保反應的實際穩定是25oC。
因此，測定人員必須：（1）弄清每一步測定操作的目的，（2）理解該步測定操作的原理，（3）判斷該步測定操作是否確實實現了目的，才能確保測定操作的規范和到位。
2.5.1 稱量時取樣是否具有代表性
一個樣本需要測定多個指標，測定每個指標前通常都要稱量該樣本的一部分，即稱量時取樣。為了保證測定值能夠真實地反映該樣本的整體狀況，就需要所取的部分樣本具備代表性。否則不僅該指標的測定值不能代表樣本的整體狀況，而且容易造成不同測定指標的測定值相互矛盾。
例如比較大的果實或者葉片，每次實際需要樣本量0.2克。如何取樣才能代表整個果實或者葉片呢？（1）沿著對稱軸多次分割，直到其中一份接近0.2克；或者（2）簡單分割后加液氮迅速粉碎成粉末，分裝后再稱量。
2.5.2 稱量時溫度控制是否嚴格
低溫保存的樣本，在稱量過程中也需要保持低溫：（1）避免室溫下擬測定指標發生顯著變化，（2）避免室溫下樣本吸附水汽，造成稱量不準確。
通常把樣本從超低溫冰箱取出后置于冰上。但是要注意：（1）一次不要取出過多的樣本，最好3~5個樣本，能夠在10分鐘內稱完，以免在室溫中時間過長；（2）樣本袋不要堆積在冰上，最好單層放置，以免上層樣本迅速升溫；（3）當初取樣時就要小包裝，避免同一袋樣本多次取出和放回冰箱，造成反復凍融，樣本變質。
2.5.3 提取時不同樣本的勻漿程度是否保持一致
在勻漿時，除了低溫管理外，保證不(bu)同(tong)樣本的勻漿程度(du)一致是非常關(guan)鍵(jian)的。不(bu)(bu)同(tong)樣(yang)本的勻漿程度不(bu)(bu)一致(zhi)，是測定數據重復性差、差異不顯著和變化不規律的重要原因。例如手動勻漿時由于手累，1號樣本的細胞破碎程度是80%，而20號樣本可能就只有60%，僅僅因為勻漿程度不同，就會造成重大差異。這就是我們推薦使用自動勻漿機的主要原因。
生化測定時經常會測定樣本的可溶性蛋白(bai)質(zhi)含量，并以可溶性蛋白質含量作為分母，參與計算，尤其是酶活性測定時。因為可溶性蛋白質含量的高低，在一定程度上代表了樣本勻漿程度（勻漿程度越高，從細胞中釋放到提取液中的可溶性蛋白質越多），從而矯正了不同樣本勻漿程度不同而造成的誤差。但是該做法隱含了一個假設，即不同樣本的可溶性蛋白質總量是一致的。但是事實上不同樣本的可溶性蛋白質總量很可能差異比較大。另外，需要特別指出的是，計算樣本酶活性時使用可溶性蛋白質含量，是對生化中酶活力的誤用，并沒有生理意義，還不如鮮重作為分母的生理意義恰當，因為酶畢竟是在細胞或者組織中發揮作用，與其在細胞或者組織中的濃度更加密切相關。
2.5.4 分離時溫度控制是否到位
常見的分離手段包括：（1）離心，（2）過柱。在分離過程中，尤其是離心時，為了保證酶不失活或者物質不降解，通常需要控制在低溫中進行。
與前述反應溫度控制類似，在離心過程中同樣需要對溫度進行規范和到位的控制：提前打開離心機，并設定到所需溫度，以確保離心時離心機腔和轉子處于設定的低溫中。
2.5.5 反應相關操作是否規范和到位
主要包括：（1）臨用前配制的試劑是否控制了時間，（2）加液順序是否正確，（3）加液體積是否準確，（4）反應溫度控制是否精準，（5）反應時間控制是否正確，（6）顯色物質是否處在穩定期。
之所以有些試劑需要臨用前配制，主要是因為這些試劑不穩定，室溫下易氧化失效。這就要求：（1）一次配制的量不要大，以免浪費；（2）在加液前半小時配制，不宜過早；配制后應該在兩小時內用完。
加液順序是有要求的，應該嚴格按照說明書的順序加各種試劑，以免反應不能正常進行。
加液體積必須準確，否則測定數據就不會準確。移液槍的刻度調整和吸取時不能有氣泡。最好使用排槍，能夠有效減少加液體積的誤差。
反應溫度的精準控制如前述，不再贅言。
反應時間控制很重要：（1）反應時間直接參與計算的測定指標，反應時間控制不精準，直接影響計算結果；（2）從加完試劑，到上機開始讀數的時間應該盡可能控制一致，如果不同樣本上述時間間隔差異大，隨著反應的進行，一方面底物和產物濃度在改變，另一方面在反應進行了不同時間段其反應曲線的斜率可能發生顯著變化，嚴重影響測定結果。我們曾經碰到過，酶活性測定值嚴重偏低，接近于零。檢查各種原因后，居然發現是因為酶活性特別高，在加完試劑到上機讀數時，已經進入反應的平臺期，即反應已經接近完成，吸光度幾乎沒有差異，只有微小的波動。
顯色物質是否處于穩定期也很重要。在顯色物質穩定期外進行測定，測得數據就不真實：（1）在穩定期前測定，則測定數據偏低；（2）在穩定期后再測定，則測定數據同樣偏低。
有一次，在用考馬斯亮藍測定可溶性蛋白質含量時，因為餓了，我在加完試劑后去吃了個飯，等吃完飯回來再上機測定時，發現吸光度都一樣，只能重來。
2.6 預測定
通過預測定，可以判斷：（1）測定用品的質量是否可靠，（2）測定方(fang)法是否合適，（3）測定操作是否規范、到位，（4）樣本的質量(liang)是否可靠。
預測定情況：（1）測定能否順利進行，（2）技術重復性好壞，（3）樣本重復性好壞。
根據上述預測定情況，進行全面分析。如果測定能夠順利進行，技術重復性好，樣本重復性也好，那么就可以開始正式測定。
如果測定不(bu)能順利進行(xing)，原因可能是：（1）測定用品（儀器設備、試劑和耗材）質量不合格，尤其是試劑質量問題，有時是耗材質量問題，儀器設備質量問題比較罕見；（2）測定操作，漏加某種試劑了，加液順序錯了，臨用前配制的試劑配制太早而變質了，比色皿或者酶標板選錯了，樣本變質導致酶失活了，等等。
如果技(ji)術重復性差(cha)，原因是測定操作不規范和不到位：（1）樣本稱量不準確，或者未控制好稱量的溫度；（2）勻漿程度不一致，尤其是手動勻漿；（3）加液體積不準確；（4）反應條件，尤其是反應溫度控制不嚴格；（5）開始反應到上機測定時間未嚴格控制，（6）從顯色到測定時間控制不當，未在顯色穩定的時間段內完成測定，早了顯色不完成，晚了顯色不穩定，等等。
如果樣本重復(fu)性(xing)差，原因是取樣的重復性差。只能放棄這批樣本，重新準備樣本；或者增加測定的重復次數，以降低變異系數。
此外，測定方法不合適也是常見的重要原因。鑒定測定方法是否合適，可以：（1）如果有標準品，即擬測定物質的標準品，或者擬測定酶活性的商業化酶，那么可以用標準品進行測定，看看測定數據，是否與標準品標簽上標明的含量或者活性一致，重復性如何；（2）如果沒有標準品，可以參考文獻，選擇含量或者活性比較高的新鮮樣本（不一定是自己擬檢測的樣本，可以是文獻報道的其它樣本），來進行實際測定，以驗證測定方法是否合適。
做好預(yu)測(ce)定，才能確保：（1）正式(shi)測(ce)定順利進行，（2）正式(shi)測(ce)定數據可靠、真實和可用。
3. 不同生化測定方式的風險
現有生化測定方式有：（1）傳統(tong)方式，即課題組自己完成確保生化測定工作；（2）試劑盒方式，即課題組購買試劑盒，在測定外包公司的支持下自己完成樣本準備、預測定和正式測定；（3）代(dai)測方式，即課題組購買代測服務，課題組自己完成樣本準備，其它工作全部由測定外包公司完成。其中試劑盒方式和代測方式屬于測定外包。
從測(ce)定效果、效率和綜合成本綜合衡量，試劑(ji)盒(he)方式(shi)顯(xian)著(zhu)優(you)于傳統方式(shi)，而代測(ce)方式(shi)又顯(xian)著(zhu)優(you)于試劑(ji)盒(he)方式(shi)。
3.1 傳統方式的風險
如上所述，準備質可靠、數合理和量充足的生物樣本，選擇合理的測定指標，建立合適的測定方法，進行規范和到位的測定操作，通過預測定確保正式測定順利進行和正式測定數據可靠、真實和可用，需要良好的測定條件和強大的測定能力。
根據測定條件和測定能力，課題組可以分為改善型課題組和剛需型課題組。改善型課題組(zu)是指具備：（1）良好的測定條件，包括測定所需的儀器設備、試劑和耗材；（2）強大的測定能力，包括豐富的測定經驗和端正的測定態度，從而能夠按計劃完成全部生化測定工作的課題組。剛需(xu)型課(ke)題組是指（1）測定條件差，尤其是缺乏測定所需的儀器設備，或者（2）測定能力差，尤其是不能順利建立合適的測定方法，不能保證測定操作規范和到位，或者（3）缺乏足夠的測定時間，尤其是快要結題或者畢業，從而不能按計劃完成全部生化測定工作的課題組。
改善型課題組可以選擇傳統方式。改善型課題組選擇傳統方式的優點在于：（1）全部測定工作都在課題組自己控制之下，對測定數據的質量比較放心；（2）節省經費。改善型課題組選(xuan)擇(ze)傳統方式(shi)的(de)缺點在于綜合成本高，主要是時間和精力，降低了科研整體效率，從而難以在激烈的同行競爭中脫穎而出，百尺竿頭再進一步。尤其是在需要測定新指標時，課題組將在建立合適的測定方法上花費很多時間和精力。
與改(gai)善型(xing)課題組(zu)不(bu)(bu)同，剛(gang)需型(xing)課題組(zu)不(bu)(bu)適合(he)選擇傳統方式。剛需型課題組，尤其是缺乏測定經驗，將導致在建立合適的測定方法和保證測定操作規范、到位等方面，花費大量的經費、時間和精力，甚至因為測定反復失敗，而不能按時結題和研究生順利畢業。如此一來，剛需型課題組就幾乎不可能在激烈的同行競爭中脫穎而出了。
3.2 試劑盒方式的風險
相比傳統方式，試劑(ji)盒方(fang)式的優點在于：（1）顯著減少了測定的工作量，無需自己建立合適的測定方法和配制各種試劑；（2）顯著降低了測定的難度，尤其是根據預測定情況優化或者更換測定方法的難度，因為測定外包公司提供預測定和正式測定的技術支持；（3）能夠得到測定外包公司在選擇合理的測定指標，準備質可靠、數合理和量充足的生物樣本，全面分析正式測定數據等方面的建議，從而顯著提高了課題組“輕松、及時拿到可靠、真實和可用的測定數據”的概率。
相比傳統方式，試劑(ji)盒方式的缺點：（1）課題組仍然需要需要自己完成預測定和正式測定，對于課題組的測定條件和測定能力有較高的要求；（2）測定外包公司不靠譜，（3）與測定外包公司溝通不到位，從而導致事倍功半，測定失敗，甚至拿到假數據。
3.2.1 剛需型課題組誤選試劑盒方式
由于試劑盒方式需要課題組自己完成預測定和正式測定。因此，課題組必須具備：（1）測定所需的測定用品，包括儀器設備、耗材和自備試劑（易燃、易爆等不允許快遞的個別試劑），（2）測定操作規范和到位。
改善型課題組選擇試劑盒方式，可以顯著提高測定效率，而試劑盒費用又顯著低于代測方式，性價比高。
剛需型課題組不適合試劑盒方式，一旦誤選試劑盒方式，很可能因為：（1）缺乏必需的測定用品，而不能順利完成預測定；或者（2）無法保證測定操作規范和到位，而導致測定數據不真實和不可用，甚至測定不能正常進行。
課題組應該根據自己的測定條件和測定能力，實事求是地決定是否選擇試劑盒方式。尤其是向測定外包公司索要擬測定指標的說明書：（1）按照說明書中“所需儀(yi)器設(she)備(bei)和自備(bei)用品”一欄，仔細核對測定所需用品，落實課題組是否具備所需的儀器設備、自備試劑和耗材，缺乏任何一種測定用品，試劑盒都無法正常使用；（2）按照說明書的操作步驟，實事求是地評估自己的測定能力，不要高估，如果測定操作不熟悉，無把握，就不要選擇試劑盒方式。
我司在11年的生化測定外包實踐中，多次碰到課題組誤選試劑盒方式，預測定無法順利進行后被迫改選代測方式，從而浪費經費、樣本和時間的情況。
3.2.2 測定外包公司不靠譜
畢竟生化測定是專業的事，而專業的事就得專業的人或者公司才能做好，因此在選擇試劑盒方式完成生化測定時課題組必須與靠譜的生化測定外包公司合作，才能輕松、及時拿到可靠、真實和可用的生化測定數據。
靠譜的(de)生化測(ce)定外包公(gong)司必須具(ju)備：（1）強大的專(zhuan)業能力(li)，尤其是豐富的自主研發經驗和測定外包經驗，否則課題組為什么要與其合作；（2）良好(hao)的誠信記錄，尤其是老用戶的口碑，否則課題組怎么敢與其合作；（3）巨大的失信代價，否則測定外包公司怎么能約束住失信的沖動。
不靠譜的(de)生化測定外包公司常常有下列表現：（1）虛假宣傳，（2）故意誤導，（3）誘之(zhi)以利。尤其是通過競價排名、打折促銷和送禮品等來騙單。
作為課題組要避(bi)免被不靠譜的生化測定外包公司騙單，需要注意：（1）不隨(sui)意，隨便搜索一下，看到排名前幾名的公司，就選擇其作為合作對象，那么你就落入了“競價排名”的陷阱；（2）不輕信，有些測定外包公司把網站做得特別炫，給用戶大包大攬的承諾，有些經銷商也出于自己的短期利益，而配合進行虛假宣傳，其實是哪家測定外包公司給的折扣大，就極力向課題組推薦哪家；（3）不貪小利，牢記課題組的核心和長遠利益是“輕松、及時拿到可靠、真實和可用的測定數據”，以優質結題和順利畢業，而不是一點折扣和禮品，很簡單，為什么要打折和送禮品，不就是因為試劑盒和代測質量不行，或者在用戶中缺乏良好的口碑，而不得不通過打折和送禮品吸引課題組購買嗎？
3.2.3 與測(ce)定外包公司溝通不(bu)到(dao)位
在選擇試劑盒方式和合作測定外包公司后，決定測定成敗的就是與測定外包公司的溝通了。
通過與測定外包公司主動(dong)溝(gou)通，課題組：（1）明確自己是否適合試劑盒方式，（2）如何準備質可靠、數合理和量充足的生物樣本，（3）確定合理的測定指標，（4）如何進行預測定，（5）就預測定情況判斷樣本質量、試劑盒質量和測定操作是否規范到位，（6）是否有必要優化甚至更換測定方法，最終確定正式測定的測定方法和測定指標，（7）如何全面分析正式測定數據是否可靠、真實和可用等。
最關鍵的是：（1）及早咨詢(xun)，在準備生物樣本前就主動咨詢，包括測定方式、測定指標和樣本準備等；（2）如(ru)實溝(gou)通，包括樣本情況、測定條件、測定能力和預測定情況，尤其是預測定的原始數據；（3）友好協商，尊重科學，實事求是，以真正解決問題為原則，而不是扯皮和推諉。
3.3 代測方式
相比試劑盒方式，代測方式(shi)的優點是：（1）測定工作量進一步顯著減少，課題組只要準備樣本，連預測定和正式測定都不用自己做了；（2）測定難度降低到零，課題組既不需要具備相應的測定條件和測定能力，也不需要根據預測定情況判斷樣本質量、試劑盒質量和測定操作是否規范到位，尤其是不需要根據預測定情況優化或者調整測定方法；（3）測定效果更加有保證，測定效率進一步大幅提升。
相比試劑盒方式，代測方式的缺點：（1）測定完全由測定外包公司完成，課題組無法控制測定質量，只能取決于測定外包公司的誠信；（2）測定費用增加。
3.3.1 代測方式適合于所有課題組
如果說試劑盒方式只適合于改善型課題組，那么代測方式不僅適合于改善型課題組，畢竟測定效率更高，而且是剛需型課題組的唯一選擇，因為測定難度降低到了零。
3.3.2 測定外包公司不靠譜
與試劑盒方式相比，代測方式對測定外包公司要求更高，尤其是其測定能力和誠信記錄。
3.3.3 與測定外包公司溝通不到位
相比試劑盒方式，代測方式同樣要求課題組與測定外包公司溝通到位，只是溝通量要少一些，課題組不再需要就預測定情況與測定外包公司反復溝通，只要及時、認真(zhen)審(shen)查測(ce)定外包(bao)公司提供的(de)預測(ce)定數據(ju)即(ji)可。
紙上得來終覺淺，絕知此事要躬行。您能耐心讀到這里，應該已經厘清了生化測定及其外包的主要風險了。但是知易行難，要在生化測定及其外包的實踐中真正控制好上述風險，還需要您：（1）始終牢記生(sheng)化(hua)測定及其外(wai)包的(de)真正目(mu)的(de)，即“輕松、及時拿到可靠、真實和可靠的生化測定數據”，（2）根據自己的測定條件和測定能力，選擇合適的測定方式，（3）選擇靠譜的測定外包公司，（4）及早咨詢、如實溝通和友好協商，發揮各自優勢，做好應該也只能自己完成的工作，相互配合，即“不隨意、不輕信和不貪小利”。
今天是我司成立11周年紀念日。在我司11周年慶之際，我代表我司全體員工和經銷商，預祝：課題組老師優質結題，成功申請到新課題，升職加薪；課題組研究生順利畢業，找到滿意的工作！
題外話：
1. 本文是我司對從事生化測定外包11年的經驗和教訓的總結和思考，歡迎各位讀者來函批評指正(zheng)（郵箱sdzlc2008@126.com）。
2. 如果您認為有一點參考價值，敬請分享給您的同事、同學和朋友。
3. 歡迎(ying)友商引用，大家一起努力提升生化測定外包質量，幫助廣大課題組“輕松、及時拿到可靠、真實和可用的生化測定數據”，為我國生命科學研究盡微薄之力。