發布日期：2025-02-10 10:36 瀏覽次數： 作者：admin
1 目的
四氯化鈦法是生物樣本H2O2含量的經典檢測方法。基于四氯化鈦法，我司研發了2款H2O2含量檢測試劑盒：（1）酶標儀，貨號H2O2-1-Y，規格100管/96樣，售價350元/盒；（2）分光光度計，貨號H2O2-2-Y，規格50管/48樣，售價180元/盒。
據試劑盒用戶和我司代測人員反映，四氯化鈦法試劑盒存在如下缺點：（1）含丙酮、濃鹽酸和氨水等，因此有刺激性氣味；（2）提取液為丙酮，因此樣本粗提液不能用于酶活性測定。
2 研發過程
考慮研發酶法生物樣本H2O2含量檢測試劑盒：（1）改用緩沖液作為生物樣本H2O2的提取液，從而樣本粗提液也能夠用于酶活性測定；（2）改用酶法檢測粗提液中H2O2含量，不再使用丙酮、濃鹽酸和氨水等，從而避免刺激性氣味。
2.1 標準曲線
制作四氯化鈦法和酶法的H2O2標準曲線。回歸方程分別為：（1）四氯化鈦法，y=0.3052x+0.0019，R2=0.9997；（2）酶法，y=0.4888x+0.0007，R2=0.9993。決定系數（R2）是四氯化鈦法略高，但是都符合要求；靈敏度則是酶法高于四氯化鈦法。
2.2 生物樣本測定
與丙酮提取不同，緩沖液提取的生物樣本粗提液中存在各種酶類，尤其是不需要其它底物的過氧化氫酶，可能造成H2O2含量測定值偏低。我們使用四氯化鈦法和酶法實際測定了生物樣本：（1）馬鈴薯塊莖H2O2含量測定值，四氯化鈦法為2.0087±0.0646 μmol/g鮮重，cv3.22%，酶法為2.2270±0.0568 μmol/g鮮重，cv2.55%；（2）小麥葉片H2O2含量測定值，四氯化鈦法為7.8026±0.4269 μmol/g鮮重， cv5.47%，酶法為8.3476±0.4685 μmol/g鮮重，cv5.61%。可見，馬鈴薯塊莖和小麥葉片的H2O2含量實際測定值都是酶法高于四氯化鈦法，從而解除酶法測定值偏低的擔憂。
2.3 酶法生物樣本H2O2含量檢測試劑盒研發
在上述工作的基礎上，我們進一步對提取液、測定體系、步驟和反應條件進行了優化，成功研發了酶法生物樣本H2O2含量檢測試劑盒。
3 建議
3.1 節省樣本用量
與四氯化鈦法相比，酶法可以節省樣本用量，同一份粗提液不僅可以用于H2O2含量的測定，還可以用于酶活性的測定。因此，如果您的樣本量少，尤其是珍稀樣本，建議您選擇酶法生物樣本H2O2含量檢測試劑盒。
3.2 減少樣本稱量和提取的次數
同一份粗提液可以用于H2O2含量和酶活性檢測。因此，如果您想減少樣本稱量和提取的次數，從而減輕測定工作量，建議您擇酶法生物樣本H2O2含量檢測試劑盒。
3.3 避免刺激性氣味
四氯化鈦法的刺激性氣味不僅影響測定體驗，而且危害身體健康。因此，如果您想改善測定體驗，維護身體健康，建議您選擇酶法生物樣本H2O2含量檢測試劑盒。
附錄
我司提供兩種酶法生物樣本H2O2含量檢測試劑盒：（1）酶標儀，貨號H2O2-1-W，規格100管/96樣，售價700元/盒；（2）分光光度計，貨號H2O2-2-W，規格50管/48樣，售價360元/盒。
檢索發現Sigma-Aldrich同類試劑盒：貨號MAK165，規格250管，售價7091元/盒。
換算成單管價格：我司為7元/管，Sigma-Aldrich為28元/管。